НАБОР РЕАГЕНТОВ ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АКТИВНОСТИ АЛАНИНАМИНОТРАНСФЕРАЗЫ В СЫВОРОТКЕ (ПЛАЗМЕ) КРОВИ УНИФИЦИРОВАННЫМ МЕТОДОМ РАЙТМАНА-ФРЕНКЕЛЯ
ПРИНЦИП МЕТОДА
1. L-аланин + кетоглутарат-АЛТ-пировиноградная кислота
+ L-глутамат.
2. фотометрическое определение содержания пирувата в пробе на основе реакции с 2,4-динитрофенилгидразином.
ИССЛЕДУЕМЫЙ МАТЕРИАЛ (ОБРАЗЕЦ)
Свежая сыворотка или плазма крови без следов гемолиза.
СОСТАВ НАБОРА
РЕАГЕНТ №1 – СУБСТРАТНАЯ СМЕСЬ
D, L-аланин ...................................................................... 0,2 моль/л
кетоглутаровая кислота ............................................ 2,0 ммоль/л
фосфатный буфер, рН 7,4 ............................................. 0,1 моль/л
РЕАГЕНТ №2 – РАСТВОР 2,4-ДНФГ
2,4-динитрофенилгидразин ......................................... 1,0 ммоль/л
соляная кислота .............................................................. 1,0 моль/л
КАЛИБРАТОР
пируват натрия .............................................................. 1,0 ммоль/л
РЕАГЕНТ №4 – НАТРИЙ ЕДКИЙ
NaOH ................................................................................ 4,0 моль/л
АНАЛИТИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ
Линейность ............................................ отклонение не более 10 %
в диапазоне активностей 0,067–1,25 мкмоль/(с х л)
Чувствительность ............................. не более 0,05 мкмоль/(с х л)
Коэффициент вариации ........................................... не более 6 %
Время проведения анализа .................................................. 60 мин